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以下是兔子白介素1可溶性受體I(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒的綜合使用說(shuō)明:
BS-4068 兔子白介素1可溶性受體I(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒 天津本生
一、實(shí)驗(yàn)原理
采用雙抗體夾心法:包被抗IL-1sRⅠ抗體的微孔板捕獲樣本中的目標(biāo)蛋白,與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合形成復(fù)合物,TMB顯色后通過(guò)OD值定量分析。
二、試劑盒組成
標(biāo)準(zhǔn)品?:凍干粉(需稀釋液復(fù)溶)
酶標(biāo)試劑?:HRP標(biāo)記抗體(3ml/6ml)
洗滌緩沖液?:50×濃縮液(需蒸餾水稀釋)
顯色系統(tǒng)?:TMB底物與終止液各12ml
輔助材料?:封板膜、密封袋、說(shuō)明書(shū)
三、樣本處理要求
樣本類(lèi)型 處理方式 保存條件
血清/血漿 2000-3000rpm離心10-30分鐘 短期2-8℃,長(zhǎng)期-20℃分裝
組織勻漿 PBS勻漿后離心取上清 -20℃避免反復(fù)凍融
細(xì)胞上清 離心去除碎片 分裝凍存
注意?:避免使用含NaN3的樣本(抑制HRP活性)。
四、操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:梯度稀釋至7個(gè)濃度,第8孔為空白對(duì)照
加樣孵育?:加50-100μl樣本,37℃孵育1-2小時(shí)
洗滌?:使用稀釋洗滌液洗板4-6次,拍干
顯色?:加TMB避光反應(yīng)15-30分鐘,終止后15分鐘內(nèi)測(cè)OD450nm
數(shù)據(jù)計(jì)算?:以標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算濃度
五、注意事項(xiàng)
不同批號(hào)試劑不可混用,底物需避光保存
顯色時(shí)間需嚴(yán)格控制,OD值超范圍需稀釋復(fù)測(cè)
實(shí)驗(yàn)需設(shè)雙復(fù)孔取平均值以減少誤差
酶標(biāo)板開(kāi)封后未用完需密封加干燥劑保存
六、技術(shù)服務(wù)支持
部分廠商提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),包括實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、數(shù)據(jù)解析等。如需具體品牌完整說(shuō)明書(shū),建議聯(lián)系供應(yīng)商獲取版本。
注:以上資料僅供參考,具體請(qǐng)咨詢(xún)技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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